下一代测序(NGS)和聚合酶链式反应(PCR)都是用于识别 DNA 序列的技术,但两者之间存在着显著差异。差异。下面将简单介绍这两种技术的基本区别。
聚合酶链反应
PCR是一种大量选择性复制特定 DNA 区域的方法。使用短DNA 引物来确定感兴趣的 DNA 区域,然后使用 DNA 聚合酶将该区域复制数千或数万次。这样,即使是极少量的 DNA 样品也能产生可分析的 DNA 数量。PCR 相对简单快捷,适合检测特定基因的存在。
新一代测序仪(NGS)
下一代测序是一种同时对许多 DNA 片段进行高速测序的技术,与 PCR 不同,PCR 只对单个 DNA 区域进行扩增。在NGS 中,DNA 首先被随机分割成许多小片段,然后在每个片段中加入一个称为适配体的短 DNA 序列。这些片段被固定在称为流动池的表面上,每个片段在流动池中同时并行测序。在每个循环中,加入带有荧光标记的核苷酸,用激光读取其荧光,从而确定 DNA 序列。
PCR 和 NGS。
PCR 技术有时会用于 NGS 过程;在 NGS 的样本制备阶段,PCR 通常用于扩增特定的 DNA 片段。这一 PCR 步骤可确保有足够数量的 DNA 进行测序。然而,NGS 的主要优势在于它能够同时处理数百万至数十亿的 DNA 片段。这使得全基因组测序、表达基因分析甚至表观遗传变化分析等广泛应用成为可能。
NGS 有时被比作“高通量 PCR”,因为它具有高通量特性,可同时进行数百万个测序反应。但实际上,NGS 比 PCR 能提供更多信息,能对遗传信息进行更复杂、更全面的分析。