从牙刷中提取 DNA 的方法。

NIPPT 歯ブラシに付着するDNAの抽出方法

本文摘要

介绍如何从牙刷中提取 DNA。它详细介绍了可在家中完成的基本程序,以及更精确的专业方法。

从牙刷中提取 DNA 通常用于法医调查或个人鉴定。一般程序如下。

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1. 收集样本

牙刷上有口腔细胞和唾液,因此很可能含有 DNA。使用牙刷后应及时采集样本并保存在干净的容器中。储存时应保持干燥,以防 DNA 降解。

2. 细胞收集

从牙刷毛上的细胞和唾液中提取 DNA 的步骤如下

  • 细胞冲洗:用适当的缓冲溶液(如 TE 缓冲液或 PBS)清洗牙刷的刷毛。这一过程可将粘附在牙刷上的细胞转移到溶液中。将整个牙刷浸入清洁溶液中并静置一段时间后,细胞就会被有效地收集起来。
  • 离心:收集洗涤液,用离心机收集细胞颗粒。细胞团是提取 DNA 的起点。

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3. 细胞裂解(降解)

向收集的细胞团中加入裂解缓冲液(如使用蛋白酶 K 的缓冲液),以破坏细胞膜并释放 DNA。这一过程是将细胞在温水浴(如 56°C)中培养数小时后进行的。这会破坏细胞核,并将 DNA 释放到溶液中。

4. DNA 提取

裂解后,可采用以下方法回收 DNA

  • 苯酚-氯仿萃取:为分离 DNA 和蛋白质,使用苯酚和氯仿进行有机萃取。上层水相中含有 DNA。
  • 商用 DNA 提取试剂盒:有许多商用试剂盒可用于高效的 DNA 恢复,可快速、轻松地提取 DNA。

5. 纯化 DNA

提取的 DNA 可能含有杂质。为去除这些杂质,可使用乙醇沉淀法或其他方法纯化 DNA,以获得纯 DNA。在此过程中,DNA 被沉淀以去除杂质。

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6. DNA 的扩增和分析

由于获得的 DNA 通常数量较少或比较零碎,因此需要使用 PCR(聚合酶链反应)来扩增特定的 DNA 区域,并将其增加到所需的数量。然后对扩增后的 DNA 进行进一步分析,用于识别个体或确认遗传关系。

摘要

从牙刷中提取 DNA 的过程基于从牙刷部位收集细胞和唾液,然后进行适当的裂解、提取和纯化过程。这种方法是法医学、亲子鉴定和其他基因检测中使用的一项重要技术。

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文章监修者


冈 博史博士

CAP实验室总监

毕业于庆应义塾大学医学部

医学博士

医生