本文摘要
进一步了解如何从用过的口香糖中提取 DNA。了解科学方法、所需程序和伦理考虑因素。
咀嚼口香糖后提取 DNA 的方法主要是从唾液和口香糖上残留的口腔细胞中恢复 DNA。具体步骤如下。
1. 收集样本
尽快用干净的容器或密封袋收集用过的口香糖。口香糖最好保持干燥,但也可保持干燥以防止储存期间 DNA 降解。
2. 细胞裂解(降解)
裂解过程,分解附着在口香糖上的细胞,释放 DNA。
- 加入裂解缓冲液:将口香糖切成小块,加入裂解缓冲液(如含有蛋白酶 K 的缓冲液)。这种缓冲液会破坏细胞膜,使 DNA 释放到溶液中。
- 孵育:将浸泡在缓冲液中的口香糖块放在温水浴(约 56°C)中孵育数小时或过夜。这样可以降解细胞并将 DNA 提取到溶液中。
3. DNA 提取
要回收溶解在裂解缓冲液中的 DNA,可采用以下方法
- 去除口香糖:培养后,去除口香糖残渣,剩余液体中含有 DNA。
- 有机萃取法:苯酚-氯仿萃取法用于从蛋白质和其他杂质中分离 DNA。在苯酚-氯仿萃取法中,上层水相(含 DNA)被小心收集。
- 商用 DNA 提取试剂盒:商用 DNA 提取试剂盒也很有效,尤其适用于从小样本中提取 DNA。
4. 纯化 DNA
由于提取的 DNA 可能含有杂质,因此要去除这些杂质,以获得纯净的 DNA。
- 乙醇沉淀法:用乙醇沉淀 DNA 以去除杂质。
- 硅胶柱纯化:还可使用硅胶柱进一步纯化 DNA。
5. DNA 的扩增和分析
由于获得的 DNA 通常数量较少,因此要使用 PCR(聚合酶链反应)来扩增特定的 DNA 区域。然后将这些 DNA 用于基因分析。最常见的分析方法是 STR 分析和 DNA 测序,用于识别个体和确认遗传关系。
摘要
从唾液或咀嚼口香糖后残留的口腔细胞中提取 DNA 的过程包括裂解、提取、纯化和扩增等阶段。这种方法是用于特定 DNA 分析(如法医调查和个人身份鉴定)的重要技术。