本文摘要
详细介绍了如何从骨骼中提取 DNA。介绍了从骨骼和古代文物中提取 DNA 的最新技术及其使用程序和实例。
从骨骼中提取 DNA 的方法主要用于古代遗骸和法医检验。这一过程需要非常小心地进行,常见的步骤如下
1. 样品制备
骨 DNA 提取通常从保存相对完好的骨头中进行。选择的骨骼部位一般都比较坚硬(如股骨或牙齿)。这样就更有可能很好地保存 DNA。
2. 骨头清洁
由于样本可能受到外部污染,因此清洁骨骼表面非常重要。这包括刮擦或清洁骨骼表面,以去除外部组织和污染物。刮除表面通常可以去除外部污染物。
3. 骨骼粉碎
为了提取 DNA,需要将骨头研磨成细粉。这需要使用专门的研磨机或磨粉机。将骨头碾碎后,就能更容易地获取包含 DNA 的骨头内部组织。
4. 去矿物质过程
骨骼中含有大量钙质,必须将其去除才能提取 DNA。在脱矿过程中,骨粉会被浸泡在酸性溶液(如 EDTA 溶液)中,以溶解并去除钙质。这有利于从骨中提取有机成分(如 DNA)。
5. DNA 提取
去矿物质后,采用常见的 DNA 提取方案提取 DNA。在这一过程中,骨粉被浸泡在裂解缓冲液(一种能破坏细胞并释放 DNA 的溶液)中,以洗脱 DNA。然后使用酚-氯仿提取法或商用 DNA 提取试剂盒回收溶液中的 DNA。
6. DNA 的纯化
提取的 DNA 可能含有蛋白质和其他杂质。为了去除这些杂质,需要对 DNA 进行纯化。乙醇沉淀和硅胶柱是常用的纯化方法。
7. DNA 的扩增和分析
由于获得的 DNA 通常是微量的片段,因此要使用 PCR(聚合酶链反应)将特定的 DNA 区域扩增到可分析的数量。然后利用 DNA 测序和 STR 分析来识别个体并确认遗传关系。
摘要
从骨骼中提取 DNA 需要一个多步骤的细致过程。其中包括样本的适当准备、DNA 的脱矿、提取和纯化。这项技术被广泛应用于考古学、法医学甚至进化生物学领域。