从骨骼中提取 DNA 的方法。

NIPPT 骨からのDNA抽出方法

本文摘要

详细介绍了如何从骨骼中提取 DNA。介绍了从骨骼和古代文物中提取 DNA 的最新技术及其使用程序和实例。

从骨骼中提取 DNA 的方法主要用于古代遗骸和法医检验。这一过程需要非常小心地进行,常见的步骤如下

1. 样品制备

骨 DNA 提取通常从保存相对完好的骨头中进行。选择的骨骼部位一般都比较坚硬(如股骨或牙齿)。这样就更有可能很好地保存 DNA。

2. 骨头清洁

由于样本可能受到外部污染,因此清洁骨骼表面非常重要。这包括刮擦或清洁骨骼表面,以去除外部组织和污染物。刮除表面通常可以去除外部污染物。

3. 骨骼粉碎

为了提取 DNA,需要将骨头研磨成细粉。这需要使用专门的研磨机或磨粉机。将骨头碾碎后,就能更容易地获取包含 DNA 的骨头内部组织。

4. 去矿物质过程

骨骼中含有大量钙质,必须将其去除才能提取 DNA。在脱矿过程中,骨粉会被浸泡在酸性溶液(如 EDTA 溶液)中,以溶解并去除钙质。这有利于从骨中提取有机成分(如 DNA)。

5. DNA 提取

去矿物质后,采用常见的 DNA 提取方案提取 DNA。在这一过程中,骨粉被浸泡在裂解缓冲液(一种能破坏细胞并释放 DNA 的溶液)中,以洗脱 DNA。然后使用酚-氯仿提取法或商用 DNA 提取试剂盒回收溶液中的 DNA。

6. DNA 的纯化

提取的 DNA 可能含有蛋白质和其他杂质。为了去除这些杂质,需要对 DNA 进行纯化。乙醇沉淀和硅胶柱是常用的纯化方法。

7. DNA 的扩增和分析

由于获得的 DNA 通常是微量的片段,因此要使用 PCR(聚合酶链反应)将特定的 DNA 区域扩增到可分析的数量。然后利用 DNA 测序和 STR 分析来识别个体并确认遗传关系。

摘要

从骨骼中提取 DNA 需要一个多步骤的细致过程。其中包括样本的适当准备、DNA 的脱矿、提取和纯化。这项技术被广泛应用于考古学、法医学甚至进化生物学领域。

文章监修者


冈 博史博士

CAP实验室总监

毕业于庆应义塾大学医学部

医学博士

医生